四.分子病理
分子诊断是应用分子生物学方法，通过检测受检个体或其携带病毒、病原体的遗传物质的结构或含量的变化而做出诊 断的技术，被广泛应用于传染性疾病、血液筛查、遗传性疾病、肿瘤伴随诊断等领域。
分子病理则是将分子诊断技术应用于病理诊断中，以组织学/细胞学标本为载体，从基因水平上检测细胞和组织的分子遗传学变化，以协助病理诊断和分型、指导靶向治疗、预测治疗反应及判断预后。
目前分子病理技术路线主要包括聚合酶链式反应（PCR）、荧光原位杂交（FISH）以及高通量测序（NGS），不同技 术路线各有优劣，其中PCR与FISH技术平台发展相对较为成熟。

分子病理：技术路线——PCR
聚合酶链式反应（PCR）是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。自上世纪80年代问世至今，PCR技术已经迭代至第三代：
第一代定性PCR：通过琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行分析，分析仅停留在定性或半定量层面，且检测时间长、有交叉感染风险。
第二代qPCR（实时荧光定量PCR）：在PCR反应体系中加入可与DNA产物特异性结合的荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，通过标准曲线实现定量分析，数据采集可在PCR扩增过程中完成。

第三代dPCR（数字PCR）：基于芯片式液滴微流控技术，将一个样本分成几万到几百万份，分配到不同的反应单元，每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA 模板) ，在每个反应单元中分别对目标分子进行 PCR 扩增，扩增结束后对各个反应单元的荧光信号进行统计学分析，可以对实现绝对定量检测。
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